利特维年科1962年8月30日生于俄罗斯城市沃罗涅日,后被征召入伍加入苏军,服役期间因表现良好获得嘉许,并晋升为中校。1988年,利特维年科加入克格勃,负责反间谍等工作。
利特维年科1991年加入俄联邦安全局,进行反恐及有组织罪案渗透工作,期间曾参与莫斯科罪案调查局的灭罪行动,获得嘉许。至1997年,利特维年科被委派往俄联邦安全局的最秘密部门,从事有组织罪案分析工作。
1998年,利特维年科声称鲍里斯·阿布拉莫维奇·别列佐夫斯基被俄罗斯联邦安全局(FSB)列入暗杀名单之中。他也声称当时已遭FSB开除,其后曾两次被捕。
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2000年11月利特维年科偕同妻儿以政治庇护为由申请移居英国,2006年10月成为英国公民。
2006年11月1日,利特维年科突感不适送院。经过多日医治后,他最终于11月23日被宣告不治身亡,终年43岁。2006年11月24日,英国卫生防护局宣布,利特维年科的尿液里发现了钋-210,且含量极高。这表明利特维年科曾被人下毒。