引物二聚体（引物二聚体和条带怎么区分）

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一般情况下，可以通过提高退火温度来降低引物二聚体。如果二聚体非常严重的话，建议重新设计引物。

引物二聚体如果不影响产物的形成，是可以忽略的，但如果二聚体过多，导致引物与模板结合的特异性过差，可以用调整PCR体系的手段来解决，比如增加酶活性，减少引物使用量，添加enhancer等等。

从PCR反应本身出发，建议适当的减少引物量、提高退火温度；如果是基于PCR产物，最好是挖胶回收，把你的目标片段特异的回收。

不会，引物二聚体的产生原因是引物之间存在大量的碱基互补配对的情况，引物在PCR过程已被消耗，放置中不会新增二聚体。在PCR体系中减少引物用量，或者提高退火温度可减少二聚体的产生。

将引物和探针互相进行配对检测，以避免二聚体和发卡结构的形成。序列选取应在基因的保守区段避免引物自身或与引物之间形成4个或4个以上连续配对，避免引物自身形成环状发卡结构典型的引物18到24个核苷长。

如果引物确定了是不同认为消除的，但是你可以设定条件来选择，还有就是自己逐个的检验，直到这几个条件都满足为止。。

引物二聚体（引物二聚体和条带怎么区分）

1、物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性；退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。

2、降低引物和聚合酶的用量，提高退火温度，或者是采用梯度PCR法，测试能够获得最佳结果的温度退火。

3、就是引物并没有与我们设想的片段结合，最后扩增出非目的条带，一般低退火温度会增加非特异性扩增，高退火温度会减少非特异性扩增。

4、DNA长度较小。那很有可能是引物二聚体。出现这个情况，可能的原因有3：1。引物本身不对，不是目的DNA扩增需要的引物。2。DNA回收提纯的问题 3。PCR体系内镁离子浓度问题。。建议排查下各项。

根本原因应该是RNA纯度不够，导致反转录的cDNA浓度低。

引物设计不合理，两条或一条引物的3`端有互补序列，造成自己配对延伸而扩增。建议重新设计引物，或者降低退火温度、增加模板和引物的量试下，不过能不能扩出来看运气了。

影响不大。探针法没影响，染料掺入法，现在的仪器都自动刷掉那些长度太小的扩增信号。有人说可能对溶解曲线产生影响，不过我做染料掺入法做的少，没试过。

1、曝光太强了，你把光圈调小一点，这样曝光会弱一点，就能够去掉背景的白色了。

2、nanodrop可以测引物二聚体紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。

3、引物二聚体的出现是必然的，但这或多或少是个问题。电泳时引物二聚体带的缺失并不意味着没有二聚体，而是其含量低，我们肉眼是看不到的。

1、从PCR反应本身出发，建议适当的减少引物量、提高退火温度；如果是基于PCR产物，最好是挖胶回收，把你的目标片段特异的回收。

2、有时扩增不出来。为了保证实验的重复性和稳定性，需要尽可能减少引物二聚体的发生。一般情况下，可以通过提高退火温度来降低引物二聚体。如果二聚体非常严重的话，建议重新设计引物。

3、pcr产物回收试剂盒能去除引物二聚体，因为有很好的吸附性。引物二聚体在不同领域中有不同意义，但基本涵义都表示相同或同一种类的物质，以成双的型态出现，可能具有单一状态时没有的性质或功能。

4、如果引物确定了是不同认为消除的，但是你可以设定条件来选择，还有就是自己逐个的检验，直到这几个条件都满足为止。。

5、引物二聚体如果不影响产物的形成，是可以忽略的，但如果二聚体过多，导致引物与模板结合的特异性过差，可以用调整PCR体系的手段来解决，比如增加酶活性，减少引物使用量，添加enhancer等等。

1、是在pcr反应中，两条引物上的互补碱基相结合形成的聚合体，这种聚合体出现了，就相当于原本可以扩增的原料链减少了，即会导致扩增的效率降低，所以最好能避免这种物质的出现。

2、引物二聚体是引物的3端间相互错配扩增形成的。引物二聚体的出现是必然的，只是或多或少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我们的肉眼看不到而已。

3、引物二聚体是引物3端不匹配放大形成的。引物二聚体的出现是必然的，但这或多或少是个问题。电泳时引物二聚体带的缺失并不意味着没有二聚体，而是其含量低，我们肉眼是看不到的。