Fluorochrome GFAP抗体(FC50001)背景:
GFAP是成熟胶质细胞的标志物。这种抗体是多克隆的,在兔体内培养至肽序列NAGFKETRASERAE(人、大鼠和小鼠),通过戊二醛,然后注射到兔子体内。该抗体已用于大鼠和人脑组织的免疫细胞化学。
小瓶中含有约200ul,稀释度为抗体可在BSA稀释剂(50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中进一步稀释至至少1/30000。抗体应储存在-20℃。还包括滤纸用于阻断的特异性肽。可将500ul稀释的抗体加入试管中uM块。在室温(RT)下孵育至少1小时,然后施用于组织。抗体与该肽特异性阻断,而不与滤纸上吸收的其他肽阻断。
GFAP抗体(FC50001)基本参数:
中文名称:GFAP抗体
英文名字:GFAP Antibody -W
cat#:FC50001
规格:200ul
应用类型:IHC
免疫原:这种抗体是多克隆抗体,在兔体内产生的肽序列是NAGFKETRASERAE(人、大鼠和小鼠),在注射到兔体内之前,用戊二醛将其与甲状腺球蛋白偶联。
来源宿主:兔
反应性:人,大鼠
保存建议:小瓶中含有约200微升1/100稀释液。 抗体可在BSA稀释液(50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中进一步稀释至至少1/20,000。 抗体应在-20 ℃下储存。 还包括吸附有用于封闭的特异性肽的滤纸。 可向管中加入500 μ l稀释的抗体以获得10 μ M阻断。 应用于组织前,在室温(RT)下孵育至少1小时。 抗体特异性地与该肽阻断,而不与吸附在滤纸上的其他肽阻断。
GFAP抗体(FC50001)基本操作:
将新鲜冷冻的10-30微米切片在室温下固定在4%多聚甲醛(FA)中1小时磷酸盐缓冲盐水(PBS),并在PBS中与0.1-0.3%H2O2孵育10至30分钟。这个再次在PBS中洗涤组织,然后用Avidin/Biotin阻断试剂盒(Vector cat#SP-2001)处理,洗涤并在室温下用BSA稀释剂孵育1小时。将GFAP抗体(1/30000)应用于组织在室温下过夜。
在PBS中洗涤后,将切片在1/1000的生物素化GAR中孵育(Vector labs cat#BA1000)在室温下1小时,洗涤,然后在阿维丁/生物素中以1/1000(Vector labs cat#PK6100)在室温下1小时。洗涤后,用二氨基联苯胺(0.04%)在0.1M乙酸钠与0.06%H2O2混合六分钟(也可加入2.5%的氯化镍)。然后对切片进行水洗(如果需要,进行复染)、脱水并盖上盖子。
Fluorochrome GFAP抗体(FC50001)也适用于Fluorochrome有限责任公司出售的BRDU抗体可视化方案。可以使用4%FA灌注组织代替新鲜冷冻切片。